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电泳缓冲液与凝胶加样液配置指南 - 尊龙凯时。

发布时间:2025-03-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在分子生物学和生物医学研究中,电泳缓冲液的配制至关重要。以下是两种常用的电泳缓冲液的详细配方。

电泳缓冲液与凝胶加样液配置指南 - 尊龙凯时。

1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

为制备1L的50×Tris-乙酸缓冲液,各成分及用量如下:

  • 2 mol/L Tris碱:242 g
  • 1 mol/L 乙酸:571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
  • 100 mmol/L EDTA:200 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 补足至1L水

2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液

为制备1L的5×Tris-硼/酸缓冲液,各成分及用量如下:

  • 445 mmol/L Tris碱:54 g
  • 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
  • 10 mmol/L EDTA:20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 补足至1L水

3. 染料配制

在分子生物学研究中,常用的染料及其配制方法如下:

3.1 1%溴酚蓝

将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,搅拌或用涡旋混合直至完全溶解。

3.2 1%二甲/苯青FF

将1 g二甲/苯青FF溶解于适量水中,定容至100 ml。

3.3 10 mg/ml的溴化乙锭

小心称取1 g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。用铝箔包裹装液管,储存于4℃。

4. 凝胶上样液

根据实验需求,凝胶上样液的制备方法如下:

4.1 6×碱性凝胶上样液

配制10 ml的各成分用量如下:

  • 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
  • 18%聚蔗糖(400型):适量
  • 0.15%溴甲酚绿
  • 0.25%二甲/苯青FF
  • 水:300 µl
  • 10 N氢氧化钠:120 µl
  • 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):18 g
  • 补足至10 ml

5. 结语

通过上述配方的制备,可以为生物医学研究提供必要的实验条件。使用尊龙凯时的高质量实验试剂,确保实验的准确性与可靠性。